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分离大肠杆菌

时长：5 分钟

类别：化工生物技术

简介：本视频演示了分离大肠杆菌的步骤。

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GFP恢复 1概述

发酵完成后，捞出肉汤并送回回收。把大肠杆菌的宿主细胞从液体培养基中分离出来，然后悬浮在一种新的溶液中清洗细胞。
生物反应器

发酵需要严格监测和控制生物反应器内的环境。该反应器配备了一个水套来调节温度，并集成传感器来监测关键因素，如溶解氧，pH值，内部温度，水套温度和容器压力。反应器也有一个搅拌器，用于添加菌种储备和培养基成分的专用端口，酸、碱补充的单独端口，用于供气和排气的空气过滤器，以及用于抽取样本及收获的阀门。多数情况下，发酵过程和监测功能可以从生物反应器的专用过程控制器进行管理。
生物产品的分离技术

不同的生物体或同一生物体的不同部位的组织，其细胞破碎的难易不一，使用的方法也不相同，节目针对不同的生物细胞，介绍了不同的细胞破碎技术及相应的原理。
GFP纯化 4疏水作用色谱法

当所有的洗脱液都被收集后，就到了采用疏水相互作用层析法的时候了。疏水相互作用层析法是基于树脂表面的疏水化学物质与GFP蛋白上的疏水贴膜相结合的原理。
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分离纯化某一特定蛋白质的一般程序可以分为前处理、粗分级、细分级三步。在接下来的节目中我们就将讨论蛋白质的纯化方法以及纯化过程。
GFP恢复 4二次离心

第二次均质后，裂解的细胞溶液通过离心泵抽回。但这一次，我们的目标不同。在裂解之前，我们的产品被保存大肠杆菌细胞中。现在，随着细胞分裂，包括细胞质和绿色荧光蛋白在内的细胞内容物被混合到缓冲溶液中。离心机再次排出固体——主要是细胞碎片——剩下的就是含有我们产品的澄清液体——绿色荧光蛋白!这一次我们丢弃固体而保留液体——现在这种液体被称为裂解液。
细胞破碎法1

细胞破碎技术是分离纯化细胞内合成的非分泌型生化物质的基础。我们将在本节目中介绍两种细胞破碎技术，包括超声波破碎法和高压匀浆破碎法。

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